在化學中,分光光度法是定量測量材料的反射或透射特性作為(wei) 波長的函數。它比通用術語電磁光譜更具體(ti) ,因為(wei) 分光光度法處理可見光、近紫外和近紅外,但不包括時間分辨光譜技術。
分光光度法使用光度計,稱為(wei) 分光光度計,它可以測量光束的強度作為(wei) 其顏色(波長)的函數。分光光度計的重要特征是光譜帶寬(它可以通過測試樣品透射的顏色範圍)、樣品透射百分比、樣品吸收的對數範圍,有時還有反射率測量的百分比。

分光光度計通常用於(yu) 測量溶液、透明或不透明固體(ti) (如拋光玻璃)或氣體(ti) 的透射率或反射率。盡管許多生化物質是有色的,例如它們(men) 吸收可見光,因此可以通過比色程序進行測量,但即使是無色的生化物質通常也可以轉化為(wei) 適合顯色成色反應的有色化合物,從(cong) 而產(chan) 生適合比色分析的化合物。然而,它們(men) 也可以設計為(wei) 使用不同的控製和校準來測量通常覆蓋約200nm至2500nm 的任何列出的光範圍的擴散率。在這些光範圍內(nei) ,需要使用根據光度測定波長而不同類型的標準在機器上進行校準。
使用分光光度法的實驗的一個(ge) 例子是確定溶液的平衡常數。溶液中的某種化學反應可以正向和反向發生,其中反應物形成產(chan) 物,產(chan) 物分解成反應物。在某個(ge) 時刻,這種化學反應會(hui) 達到一個(ge) 平衡點,稱為(wei) 平衡點。為(wei) 了確定此時反應物和產(chan) 物的各自濃度,可以使用分光光度法測試溶液的透光率。通過溶液的光量表示不允許光通過的某些化學物質的濃度。
光的吸收是由於(yu) 光與(yu) 分子的電子和振動模式的相互作用。每種類型的分子都有一組與(yu) 其化學鍵和原子核的組成相關(guan) 的單獨的能級,因此會(hui) 吸收特定波長或能量的光,從(cong) 而產(chan) 生獨特的光譜特性。這是基於(yu) 其特定和獨特的構成。
分光光度計的使用跨越多個(ge) 科學領域,如物理學、材料科學、化學、生物化學和分子生物學。它們(men) 廣泛用於(yu) 許多行業(ye) ,包括半導體(ti) 、激光和光學製造、印刷和法醫檢驗,以及用於(yu) 研究化學物質的實驗室。分光光度法通常用於(yu) 測量酶活性、確定蛋白質濃度、確定酶動力學常數和測量配體(ti) 結合反應。最終,分光光度計能夠根據控製或校準來確定目標中存在哪些物質,以及通過計算觀察到的波長來準確確定物質的含量。
掃一掃谘詢微信客服