可見分光光度計是用於(yu) 檢測和跟蹤被測物質對可見光吸光度進行定量分析的儀(yi) 器設備。
溶液中的物質受下,溶液中的物質對光的吸收有選擇性的影響。各種不同的物質都有自己的吸收光譜,所以當單色光通過溶液時,它的能量會(hui) 被吸收和減弱,光能的減弱程度與(yu) 物質濃度有一定的比例,即符合朗伯一比爾定律(見圖片3-10)。

當液體(ti) 的光程長度保持不變時,通過光根據溶液的濃度而變化。可見,分光光度計的基本原理是根據上述物理光學現象設計的。
分光光度計由磁飽和穩壓器、單色器和檢流計三部分組成。使用時,應使用導線3-11接好。

單色器和穩壓器的輸出接線柱5.5V或10V連接,然後根據導電片上套管的顏色,將單色器連接到檢流計,紅色套管的導電片連接到十,綠色套管的導電片連接到一,第三個(ge) 導電片接地線。穩壓器和檢流計分別連接220V電源。
光柵分光光度計采用自準色散係統和單光束結構,色散元件為(wei) 衍射光柵,波長為(wei) 330~800nm數字顯示讀數也可以直接測量溶液的濃度。其形狀如圖所示3-12所示。

(1)在連接電源之前,穩壓器、檢流計和單色器的電源開關(guan) 應關(guan) 閉。光量調節器逆時針轉向最小位置,單色器光門撥打黑點,然後連接穩壓器和檢流計220V交流電源。
(2)打開檢流計電源開關(guan) ,從(cong) 斷開到直接或直接X1檔,指示光點出現在標尺上,用零位調節器準確地將光標調整到透光標尺的0點。
(3)打開穩壓器和單色器的電源開關(guan) ,將光閘撥到紅色點,然後順時針旋轉光調節器,使檢流計的指示光標線達到標尺上透光率的100%附近,並進行預熱10min光標穩定後再使用。(4)將波長調節器調整到所需的波長。
(5)將單色器的光閘門撥到黑點,再次檢查檢流計的零位(即透光率為(wei) 0)。
(6)將盛有空白溶液的比色皿放入比色皿架的第一格中,剩下的=放入待測溶液,蓋上暗箱蓋,將空白溶液推入光路(拉杆推到底)。將光閘撥到紅點,輕輕調節光量調節器,將光標準確調節到透光率100讀數。
(7)拔出拉杆,使有色溶液進入光路,光標所指A值是溶液的吸光度,然後依次測量其他溶液。
(8)測量完成後,取出比色皿,倒出溶液,用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨,吸幹,放回比色皿盒中。所有旋鈕和開關(guan) 恢複到使用前狀態,切斷電源,覆蓋儀(yi) 器。
1)打開電源前,檢查每個(ge) 調整旋轉問題是否在起始位置,然後打開電源開關(guan) 。儀(yi) 器停止工作時,必須將開關(guan) 放在關(guan) 閉上,然後切斷電源。
2)隻要空白溶液的透光率能調整到100,單色器的電源電壓應用5.5V,不用10V。這主要是為(wei) 了延長光源燈的使用壽命,降低單色器的溫度。
3)檢流計背麵有兩(liang) 個(ge) 電源插孔,分別標有220V”和“6V”。若用220V交流電源時,導線插頭應橋入220V孔內(nei) ,人用6V直流電源應插入導線插頭6V孔內(nei) ,不要插錯。否則,儀(yi) 器將被燒壞。
4)在儀(yi) 器使用過程中,應注意光電池的保護,長期選擇·間照而疲勞。更換溶液並記錄讀數時.將光聞門及時拔到黑點,切斷射光。
5)注意保護比色皿透光麵的清潔度。使用時隻能用手拿毛玻璃麵,不要拿透光麵。據擦拭外部溶液時,隻能使用鏡頭紙。
6)比色皿盛放溶液不能超過其高度的4/5,以免溶液溢入機件內(nei) 部。
光柵分光光度計的使用方法
(1)連接電源前,檢查儀(yi) 器的安全性。電源線接線應牢固,接地線接地應良好,各調節旋鈕的起始位置應正確,然後連接電源。
(2)將靈敏度派或調整到1檔(最小放6倍率)。調波長調節器至所需波長。
(3)打開電源開關(guan) ,指示燈亮,選擇開關(guan) 放在‘’T調整透光率100%旋鈕,使數字顯示100.0左右,預熱20min。
(4)打開吸收地暗室蓋(光門自動關(guan) 閉),調整0旋鈕,使數字顯示為(wei) 000.0蓋上吸收地蓋,將參考溶液放在光路中,使光電管受光,調整透光度100%旋鈕,使數字顯示為(wei) 100.0”。
(5)如果不顯示100,可以適當增加電流放大器的靈敏度檔數,但應盡量使用低檔數,使儀(yi) 器穩定性更高。改變靈敏度後,必須重新校正0和100。
(6)連續幾次按(4)調整00.0在100和100之後,將選擇開關(guan) 放在A調整吸光度,調整零旋鈕,使數字顯示為(wei) .000”。然後將待測溶液推入光路,顯示值即為(wei) 待測樣品的吸光度值A。
(7)濃度c測量。開關(guan) 的選擇由A”旋至“c將標準溶液推入光路,調整濃度旋鈕。使數字顯示值為(wei) 已知的標準溶液濃度值。將待測樣品晶體(ti) 溶液推入光路,讀取待測樣品的濃度值。
(8)在大幅度改變測試波長時,調整00.0和100等一會(hui) 兒(er) (由於(yu) 光能變化急劇,光電管受光後響應緩慢,需要一段光響應平衡時間),穩定後重新調整00·0和100一起工作。
注意:
1)使用前,用戶應首先了解儀(yi) 器的結構和原理,以及每個(ge) 旋鈕的功能。
2)儀(yi) 器接地良好,否則顯示數字不穩定。
3)儀(yi) 器左下角有幹操劑筒,應保持幹燥,幹操劑變色後應立即更新或幹燥。
4)儀(yi) 器停止工作時,切斷電源,同時切斷電源開關(guan) ,並密封儀(yi) 器。
以上介紹了可見分光光度計的工作原理、結構外觀和使用方法,希望為(wei) 行業(ye) 相關(guan) 試用人員提供一些參考。
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